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細胞轉(zhuǎn)瓶在狂犬疫苗制備中的應(yīng)用
發(fā)表日期:2021-06-07

狂犬病是狂犬病毒所致的急性傳染病,人獸共患,病毒主要通過破損的皮膚或黏膜侵入人體,人患狂犬病后的病死率接近100%。當前對于狂犬病尚無有效治療手段,主要以注射狂犬疫苗預(yù)防為主。在狂犬疫苗制備中,細胞轉(zhuǎn)瓶是一種常用的培養(yǎng)容器。


細胞轉(zhuǎn)瓶

2L細胞轉(zhuǎn)瓶

狂犬疫苗分為滅活疫苗、減毒活疫苗和基因疫苗,疫苗的研發(fā)是一個漫長而復(fù)雜的過程,且成本較高,狂犬疫苗也經(jīng)歷了漫長的發(fā)展歷程,從1882年,巴斯德將牛腦中提取的狂犬病毒株,并在兔腦內(nèi)連續(xù)傳90代,成為固定毒,到90年代,引進Vero細胞疫苗。狂犬疫苗也隨著各項技術(shù)的提高在不斷完善,其中,利用細胞轉(zhuǎn)瓶制備狂犬疫苗的操作方法如下:
1、將凍存的Vero細胞進行細胞復(fù)蘇,然后使用滾瓶機進行貼壁細胞培養(yǎng)。在37℃進行傳代培養(yǎng),完成后收獲細胞。 


細胞培養(yǎng)瓶
細胞培養(yǎng)瓶


2、將病毒接種到vero細胞,并繼續(xù)傳代培養(yǎng),并同時檢查是否有染菌和外源因子。
3、將病毒懸液進行離心濃縮。
4、滅活病毒后再次離心濃縮后,進行低溫保存
5、將多份收獲的病毒進行解凍并合并,經(jīng)過離心純化用緩沖液稀釋并用0.45μm過濾后,低溫保存。
6、將疫苗分裝后,凍干保存。


細胞工廠
細胞工廠


       細胞轉(zhuǎn)瓶使用時需要借助滾瓶機一起使用,除了應(yīng)用于狂犬疫苗的制備外,還應(yīng)用于動植物細胞、細菌、病毒等的培養(yǎng),具有操作簡單、成本低,利于掌控等特點,是大規(guī)模細胞培養(yǎng)前的一個過度階段。

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