細(xì)胞培養(yǎng)瓶根據(jù)形狀的不同有直頸、斜頸、角度頸、三角形、矩形等種類，規(guī)格包括25ml、75ml、175ml、250ml，其中小規(guī)格的多用于細(xì)胞傳代、保存細(xì)胞、為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等用途。
T225細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。具體操作步驟如下：
10層細(xì)胞工廠
- 將長滿細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。
- 加入0.5—1ml 0.25％胰酶溶液，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。
- 瓶口塞好橡皮塞，放在倒置鏡下觀察細(xì)胞。隨著時(shí)間的推移，原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時(shí)將胰酶棄去，加入10ml培養(yǎng)液終止消化。觀察消化也可以用肉眼，當(dāng)見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)針孔空隙時(shí)終止消化。一般室溫消化時(shí)間約為1—3分鐘。
- 用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分到另外兩到三瓶中，實(shí)踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞，置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶在細(xì)胞傳代中的應(yīng)用，消化液的配制方法如下：稱取0.25克胰酶蛋白酶（活力為1：250），加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解，濾器過濾除菌，4℃保存，用前可在37℃下回溫。胰酶溶液中也可加入EDTA，使最終濃度達(dá)0.02％。
